غالبًا ما تكون الخطوة الأولى للتصوير ثنائي الفوتون الحي في الفئران المستيقظة هي إجراء جراحة نافذة قحفية (فتح الجمجمة) نظيفة مقترنة بـزرع حلقة الرأس. إن وضوح النافذة بصريًا وثبات تركيب حلقة الرأس يحددان بشكل مباشر نجاح كل التصوير اللاحق. يستعرض هذا المقال سير العمل الكامل — من التحضير قبل الجراحة إلى الرعاية بعد الجراحة — كمرجع مصور للباحثين.
نظرة عامة على سير جراحة النافذة القحفية
التحضير قبل الجراحة (الأدوات والمستهلكات)
الأدوات والمستهلكات للتحضير قبل الجراحة
الأدوات الشائعة: إطار التوضيع التجسيمي / قضبان الأذن، قناع التخدير، مقص جراحي طبي للعيون، ملقط طبي للعيون، مثقاب قحفي (لقمة 0.5 مم), منفاخ كمثري مطاطي، مصباح المعالجة بالضوء الأزرق، منظف بالموجات فوق الصوتية.
المستهلكات الشائعة: مرهم عيني إريثروميسين، مطهر يودوفور، محلول بيروكسيد الهيدروجين، محلول ملحي فسيولوجي، أعواد قطنية/قطن معقّم، لاصق 3M وراتنج سائل، إسفنجة مرقئة، غطاء زجاجي دائري، حلقة رأس، كيتوبروفين، جنتاميسين.
خطوات الجراحة التفصيلية
الخطوة 1: تثبيت الفأر المخدَّر
- علّق أسنان الفأر المخدَّر على قناع التخدير في طاولة الجراحة.
- ثبّت رأس الفأر باستخدام قضبان الأذن، واضبط وضعية الرأس بتدوير المقابض في اتجاهات مختلفة.
- تحقق من تثبيت الرأس بالملقط؛ إذا لم تكن هناك حركة واضحة، انتقل إلى الخطوة التالية.
الخطوة 2: وضع مرهم عيني لحماية العينين
- ضع مرهم إريثروميسين العيني على عيني الفأر لحمايتهما خلال الخطوات التالية.
الخطوة 3: إزالة الفرو
- قص فرو أعلى رأس الفأر بعناية باستخدام المقص الجراحي الطبي للعيون، مع الحرص على عدم القص بالقرب من العينين.
الخطوة 4: التطهير باليودوفور
- طهّر أعلى رأس الفأر بمحلول اليودوفور.
الخطوة 5: شق فروة الرأس لكشف الجمجمة
- باستخدام مقص جراحي نظيف منفصل مع الملقط، اعمل أولًا فتحة في منتصف الرأس، ثم اقطع قوسًا نحو كل جانب فوق العينين لكشف الجمجمة بالكامل.
- بعد كشف الجمجمة، تحقق مما إذا كانت مستوية نسبيًا، ثم أجرِ ضبطًا ثانويًا.
الخطوة 6: معالجة السمحاق ببيروكسيد الهيدروجين
- اغمس عودًا قطنيًا في محلول بيروكسيد الهيدروجين وضعه بعناية على الجمجمة. انتظر 5–10 ثوانٍ، ثم اشطف الفائض بالمحلول الملحي الفسيولوجي.
الخطوة 7: إزالة السمحاق
- أزل السمحاق بعناية بالمقص الجراحي والملقط؛ ثم نظّف سطح الجمجمة بالقطن الممسوك بالملقط، وجففه بالهواء باستخدام المنفاخ الكمثري.
الخطوة 8: فتح النافذة بالمثقاب القحفي
- استخدم لقمة 0.5 مم بسرعة متوسطة لبدء طحن موضع النافذة.
- اطحن أولًا محيط النافذة — أصغر قليلًا من قطر الغطاء الزجاجي — ثم عمّق المحيط حلقة تلو الأخرى.
- حافظ على التركيز أثناء الطحن؛ يمكنك العمل بكلتا اليدين لتثبيت الحركة، مع نفخ فتات العظم بالمنفاخ عند الحاجة، وأبقِ النافذة رطبة بالمحلول الملحي لمنع ارتفاع الحرارة المفرط.
- عندما يكشف الضغط الخفيف على النافذة باللقمة عن ارتخاء كبير، أوقف الطحن واستعد للخطوة التالية.
الخطوة 9: إزالة الرفرف العظمي
- بلّل القطن بالمحلول الملحي الفسيولوجي لتنظيف فتات العظم وترطيب النافذة.
- ثم جفف المحلول الملحي بقطن جاف، وجفف سطح الجمجمة مجددًا بالمنفاخ.
- باستخدام الملقط على طول المحيط المطحون للنافذة، ارفع برفق وأزل الرفرف العظمي للنافذة ببطء وأخرجه.
- ضع إسفنجة مرقئة على النافذة لإيقاف النزيف، مع مراقبة فقدان الدم باستمرار والحفاظ على نظافة سطح الجمجمة. عندما تتوقف أوعية النافذة عن النزف، انتقل إلى الخطوة التالية.
الخطوة 10: تغطية الجمجمة باللاصق
- ضع لاصق 3M بالتساوي على جمجمة الفأر، مع التأكد من تغطيتها بالكامل. يعمل اللاصق كطبقة أساس، ما يربط الجمجمة بالراتنج بإحكام أكبر.
- ثم عالج بمصباح المعالجة بالضوء الأزرق لمدة 20 ثانية حتى يتصلب اللاصق تمامًا قبل المتابعة.
الخطوة 11: تثبيت الغطاء الزجاجي للنافذة
- أولًا، ضع برفق كمية مناسبة من راتنج 3M السائل حول النافذة (محيط أكبر قليلًا من قطر الغطاء الزجاجي)؛ الكمية الزائدة من الراتنج قد تتسرب إلى النافذة وتسبب فشل الجراحة.
- ضع الغطاء الزجاجي على النافذة، واضبط وضعيته، واضغط برفق بالملقط لتثبيته.
- ثم عالج راتنج 3M السائل بمصباح الضوء الأزرق لمدة 20 ثانية لتثبيت الغطاء الزجاجي بشكل مبدئي.
- بعد ذلك، غطِّ محيط سطح الغطاء الزجاجي بطبقة من راتنج 3M السائل بحيث يكون الغطاء الزجاجي بين طبقتي راتنج؛ عالج لمدة 20 ثانية حتى يتصلب تمامًا، مكملًا تثبيت الغطاء الزجاجي.
الخطوة 12: تركيب حلقة الرأس
- أولًا، غطِّ سطح الجمجمة الجاف بالكامل براتنج 3M السائل.
- باستخدام الملقط، ضع حلقة الرأس على راتنج 3M السائل. انتبه إلى اتجاه الفتحات الأربع في الحلقة، واضبط قاعدة الحلقة لتكون موازية قدر الإمكان للغطاء الزجاجي للنافذة — وإلا فقد يؤثر ذلك على جودة التصوير تحت المجهر.
- بعد تحديد الموضع النهائي لحلقة الرأس، عالج راتنج 3M السائل بمصباح الضوء الأزرق لمدة 20 ثانية حتى يتصلب تمامًا.
- ضع طبقة من راتنج 3M السائل فوق حلقة الرأس وحولها وعالج بمصباح الضوء الأزرق لمدة 20 ثانية لتعزيز التثبيت. أخيرًا، أخرج الفأر المثبَّت لإكمال الجراحة بأكملها.
· لا تدع الراتنج يلمس النافذة أبدًا.
· أبقِ الراتنج بعيدًا عن الفتحات والأخاديد المشطوفة في حلقة الرأس.
· يؤثر اتجاه الفتحات على وضعية التثبيت النهائية للفأر؛ يُفضّل إبقاء فتحة واحدة متوافقة مع اتجاه رأس الفأر.
· وجود الراتنج على الفتحات أو الأخاديد سيضعف إحكام حلقة الرأس عند تركيبها لاحقًا على الجهاز.
ملحق: تدابير الوقاية من العدوى والرعاية بعد الجراحة
- حافظ على بيئة تجريبية معزولة ومغلقة نسبيًا.
- عقّم الأدوات الجراحية.
- استخدم أعوادًا قطنية معقّمة ومحلولًا ملحيًا فسيولوجيًا معقّمًا.
- نظّف الأغطية الزجاجية وحلقات الرأس بالموجات فوق الصوتية ثم انقعها في الكحول.
- بعد فتح النافذة، احقن الكيتوبروفين والجنتاميسين كمضادات للالتهاب.
- بعد الجراحة، عقّم يوميًا بمصباح الأشعة فوق البنفسجية.
المحتوى أعلاه مخصص للأغراض المرجعية في البحث والتعلم فقط؛ والتصحيحات والإضافات مرحّب بها. للحصول على مقاطع فيديو مفصّلة للإجراء أو مواد ذات صلة، يُرجى التواصل معنا عبر البيانات الموجودة أسفل هذه الصفحة.
من نحن
SITRANTECH منخرطة بعمق في الهندسة الطبية الحيوية منذ أكثر من خمس سنوات، بالتعاون الوثيق مع المختبرات الرائدة. نقدّم لمجتمعات علم الأعصاب ودراسات السلوك والوراثة الضوئية: أنظمة أجهزة مشي بتثبيت الرأس للفئران المستيقظة، وتجارب مخصّصة تجمع بين تثبيت الرأس والإعدادات السلوكية، ومستهلكات وملحقات جراحة النافذة القحفية، وخدمات تخصيص المعدات والاستشارات التقنية. مهمتنا بسيطة: تمكين الاكتشاف العلمي من خلال الهندسة الدقيقة ونقل الابتكار من المختبر إلى التطبيق الواقعي.
نُشر لأول مرة في حساب SITRANTECH الرسمي على WeChat شكر خاص: قُدّم هذا الدليل التعليمي لجراحة النافذة القحفية من مختبرنا الشريك LNHD.
